(Праточная цытаметрыя, FCM) - гэта клеткавы аналізатар, які вымярае інтэнсіўнасць флуарэсцэнцыі вітражавых клеткавых маркераў. Гэта высокатэхналагічная тэхналогія, распрацаваная на аснове аналізу і сартавання адзінкавых клетак. Ён можа хутка вымераць і класіфікаваць памер, унутраную структуру, ДНК, РНК, вавёркі, антыгены і іншыя фізічныя ці хімічныя ўласцівасці клетак, і могуць грунтавацца на зборы гэтых класіфікацый.
Праточны цітометр у асноўным складаецца з наступных пяці частак:
1 паточная камера і сістэма Fluidics
2 лазерная крыніца святла і сістэма фарміравання прамяня
3 Аптычная сістэма
4 Электроніка, сістэма захоўвання, дысплея і аналізу
5 Сістэма сартавання клетак
Сярод іх лазернае ўзбуджэнне ў лазернай крыніцы святла і сістэмы фарміравання прамянёў з'яўляецца галоўным вымярэннем сігналаў флуарэсцэнцыі ў праточнай цытаметрыі. Інтэнсіўнасць святла ўзбуджэння і час экспазіцыі звязаны з інтэнсіўнасцю сігналу флуарэсцэнцыі. Лазер-гэта ўзгодненая крыніца святла, якая можа забяспечваць аднаразовую, высокую інтэнсіўнасць і асвятленне высокай стабільнасці. Гэта ідэальная крыніца ўзбуджэння святла для задавальнення гэтых патрабаванняў.
Існуе два цыліндрычныя лінзы паміж лазернай крыніцай і паточнай камерай. Гэтыя лінзы засяроджваюць лазерны прамень з круглым перасекам, выпраменьваным з лазернай крыніцы, у эліптычны прамень з меншым перасекам (22 мкМ × 66 мкм). Лазерная энергія ў гэтым эліптычным прамяні размяркоўваецца ў залежнасці ад нармальнага размеркавання, забяспечваючы паслядоўную інтэнсіўнасць асвятлення для клетак, якія праходзяць праз плошчу выяўлення лазера. З іншага боку, аптычная сістэма складаецца з некалькіх набораў лінзаў, штыровак і фільтраў, якія можна падзяліць прыблізна на дзве групы: уверх і ўніз па плыні камеры.
Аптычная сістэма перад паточнай камерай складаецца з аб'ектыва і лупіны. Асноўнай функцыяй лінзы і лупіны (звычайна дзве лінзы і луначку) заключаецца ў тым, каб засяродзіць лазерны прамень з круглым перасекам, выпраменьваным лазерным крыніцай у эліптычны прамень з меншым перасекам. Гэта размяркоўвае лазерную энергію ў залежнасці ад нармальнага размеркавання, забяспечваючы паслядоўную інтэнсіўнасць асвятлення для клетак па ўсёй плошчы лазернага выяўлення і мінімізуючы ўмяшанне ад бяздомнага святла.
Ёсць тры асноўныя тыпы фільтраў:
1: Фільтр доўгага праходжання (LPF) - дазваляе толькі святло з даўжынёй хвалі вышэй, чым пэўнае значэнне, каб прайсці.
2: Кароткачасовы фільтр (SPF) - дазваляе толькі святло з даўжынёй хвалі ніжэй пэўнага значэння, каб прайсці праз.
3: Паласавы фільтр (BPF) - Дазваляе святло ў пэўнай дыяпазоне даўжыні хвалі, каб прайсці праз.
Розныя камбінацыі фільтраў могуць накіроўваць сігналы флуарэсцэнцыі на розных даўжынях хваль да асобных труб для фотамультыплін (ПМТ). Напрыклад, фільтры для выяўлення зялёнай флуарэсцэнцыі (FITC) перад PMT - LPF550 і BPF525. Фільтры, якія выкарыстоўваюцца для выяўлення аранжава-чырвонай флуарэсцэнцыі (PE) перад PMT, з'яўляюцца LPF600 і BPF575. Фільтры для выяўлення чырвонай флуарэсцэнцыі (CY5) перад PMT складаюць LPF650 і BPF675.
Праточная цытаметрыя ў асноўным выкарыстоўваецца для сартавання клетак. З прасоўваннем камп'ютэрных тэхналогій, развіццём імуналогіі і вынаходніцтвам моноклональных тэхналогій антыцелаў, яе прымяненнем у галіне біялогіі, медыцыны, аптэкі і іншых абласцей становіцца ўсё больш шырока распаўсюджаным. Гэтыя прыкладанні ўключаюць аналіз клетак дынамікі, апоптоз клетак, тэкст клетак, дыягностыку пухліны, аналіз эфектыўнасці наркотыкаў і г.д.
Час паведамлення: 21 верасня 201-2023
