(Праточная цытаметрыя, ПЦМ) — гэта клеткавы аналізатар, які вымярае інтэнсіўнасць флуарэсцэнцыі афарбаваных клеткавых маркераў. Гэта высокатэхналагічная тэхналогія, распрацаваная на аснове аналізу і сартавання асобных клетак. Яна дазваляе хутка вымяраць і класіфікаваць памер, унутраную структуру, ДНК, РНК, бялкі, антыгены і іншыя фізічныя або хімічныя ўласцівасці клетак, грунтуючыся на сукупнасці гэтых класіфікацый.
Праточны цытаметр у асноўным складаецца з наступных пяці частак:
1 Праточная камера і сістэма флюідыкі
2 Крыніца лазернага святла і сістэма фармавання прамяня
3 Аптычная сістэма
4 Электроніка, сістэма захоўвання дадзеных, адлюстравання і аналізу
5 Сістэма сартавання клетак
Сярод іх лазернае ўзбуджэнне ў крыніцы лазернага святла і сістэме фармавання прамяня з'яўляецца асноўным вымярэннем флуарэсцэнтных сігналаў у праточнай цытаметрыі. Інтэнсіўнасць узбуджальнага святла і час экспазіцыі звязаны з інтэнсіўнасцю флуарэсцэнтнага сігналу. Лазер - гэта кагерэнтная крыніца святла, якая можа забяспечваць аднахвалевае, высокаінтэнсіўнае і высокастабільнае асвятленне. Гэта ідэальная крыніца ўзбуджальнага святла, якая адпавядае гэтым патрабаванням.
Паміж крыніцай лазера і праточнай камерай размешчаны дзве цыліндрычныя лінзы. Гэтыя лінзы факусуюць лазерны прамень з круглым папярочным сячэннем, які выпраменьваецца крыніцай лазера, у эліптычны прамень з меншым папярочным сячэннем (22 мкм × 66 мкм). Лазерная энергія ў гэтым эліптычным прамені размяркоўваецца ў адпаведнасці з нармальным размеркаваннем, што забяспечвае паслядоўную інтэнсіўнасць асвятлення клетак, якія праходзяць праз зону выяўлення лазера. З іншага боку, аптычная сістэма складаецца з некалькіх набораў лінзаў, адтулін і фільтраў, якія можна ўмоўна падзяліць на дзве групы: вышэй па плыні і ніжэй па плыні ад праточнай камеры.
Аптычная сістэма перад праточнай камерай складаецца з лінзы і адтуліны. Асноўная функцыя лінзы і адтуліны (звычайна дзве лінзы і адтуліна) заключаецца ў факусоўцы лазернага прамяня з круглым папярочным сячэннем, які выпраменьваецца лазернай крыніцай, у эліптычны прамень з меншым папярочным сячэннем. Гэта размяркоўвае лазерную энергію ў адпаведнасці з нармальным размеркаваннем, забяспечваючы паслядоўную інтэнсіўнасць асвятлення клетак па ўсёй зоне выяўлення лазера і мінімізуючы перашкоды ад рассеянага святла.
Існуе тры асноўныя тыпы фільтраў:
1: Даўгачастотны фільтр (ФНЧ) — прапускае толькі святло з даўжынямі хваль вышэй за пэўнае значэнне.
2: Кароткапрапускальны фільтр (SPF) — прапускае толькі святло з даўжынямі хваль ніжэй за пэўнае значэнне.
3: Паласавы фільтр (ПФ) — прапускае толькі святло ў пэўным дыяпазоне даўжынь хваль.
Розныя камбінацыі фільтраў могуць накіроўваць сігналы флуарэсцэнцыі на розных даўжынях хваль на асобныя фотаэлектронныя памнажальнікі (ФЭП). Напрыклад, фільтры для выяўлення зялёнай флуарэсцэнцыі (FITC) перад ФЭП - гэта LPF550 і BPF525. Фільтры, якія выкарыстоўваюцца для выяўлення аранжава-чырвонай флуарэсцэнцыі (PE) перад ФЭП, - гэта LPF600 і BPF575. Фільтры для выяўлення чырвонай флуарэсцэнцыі (CY5) перад ФЭП - гэта LPF650 і BPF675.
Праточная цытаметрыя ў асноўным выкарыстоўваецца для сартавання клетак. З развіццём камп'ютэрных тэхналогій, развіццём імуналогіі і вынаходніцтвам тэхналогіі моноклональных антыцелаў яе прымяненне ў біялогіі, медыцыне, фармацэўтыцы і іншых галінах становіцца ўсё больш распаўсюджаным. Да гэтых прымяненняў адносяцца аналіз дынамікі клетак, апоптоз клетак, тыпізацыя клетак, дыягностыка пухлін, аналіз эфектыўнасці лекаў і г.д.
Час публікацыі: 21 верасня 2023 г.
